《新乡医学院学报》  2011年03期 285-287   出版日期:2011-05-20   ISSN:1004-7239   CN:41-1186/R
大鼠肝再生相关基因Tax1bp1与绿色荧光蛋白融合表达的研究


摘要:目的构建大鼠肝再生相关基因Tax1bp1的真核表达载体,融合绿色荧光蛋白并在再生肝中高效表达,
观察目的蛋白的表达情况。方法利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术以大鼠再生肝为材料克隆Tax1bp1基
因的开放阅读框(ORF),然后亚克隆到表达载体上构建重组表达载体pEGFP-N1-Tax1bp1,再用尾静脉液压法转入大
鼠再生肝中进行绿色荧光蛋白融合表达。结果Tax1bp1ORF克隆正确,融合绿色荧光蛋白重组表达载体pEGFP-N1-
Tax1bp1构建成功;部分肝切除转基因6、12、24、48 h后均有荧光表达,Tax1bp1融合蛋白在上述时间点绿色荧光融合
蛋白细胞转染率分别为8.7%、11.2%、14.5%和1.2%,转染率趋势同空载体绿色荧光蛋白表达情况一致。结论重
组表达载体pEGFP-N1-Tax1bp1构建成功,并实现了绿色荧光融合蛋白的高效表达,为进一步研究肝再生相关
Tax1bp1基因功能奠定了基础。