[1]高 洁.钠通道重叠综合征相关基因SCN5A在H9C2细胞中的表达[J].新乡医学院学报,2015,32(11):975-980.
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钠通道重叠综合征相关基因SCN5A在H9C2细胞中的表达
《新乡医学院学报》[ISSN:1004-7239/CN:41-1186/R]
- 卷:
-
32
- 期数:
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2015年11
- 页码:
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975-980
- 栏目:
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基础研究
- 出版日期:
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2015-11-05
文章信息/Info
- 作者:
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高 洁
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西安交通大学医学部第一附属医院心血管内科,环境与疾病相关基因教育部重点实验室,陕西省分子心脏病学重点实验室,陕西 西安 710061
- 关键词:
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钠通道; SCN5A基因; 重叠综合征; H9C2细胞
- 摘要:
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目的 构建表型重叠家系相关基因SCN5A delQKP1507-1509突变型真核表达载体,研究其在H9C2细胞中的表达。方法 一步法定点诱变技术构建SCN5A基因delQKP1507-1509突变型真核表达载体,电穿孔方法将野生型和突变型质粒转染至H9C2细胞,应用实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)及Western blot技术检测其mRNA及蛋白表达情况。结果 琼脂糖凝胶电泳法及DNA直接测序法均表明定点突变成功,RFQ-PCR及Western blot结果显示,野生组、突变组和混合组SCN5A基因mRNA相对表达量分别为1.089±0.459、1.011±0.840和1.069±0.492,3组SCN5A基因mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。野生组、突变组和混合组SCN5A蛋白在H9C2细胞的相对表达量分别为3.781±0.221、3.466±0.176和3.714±0.198,3组SCN5A蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 成功构建钠通道基因delQKP1507-1509突变型真核表达载体并转染至H9C2细胞,该突变未引起钠通道在细胞膜的异常表达,为进一步功能研究提供了研究基础及方向。
更新日期/Last Update:
2015-11-17