[1]邵 利 伟,詹 合 琴,崔 泰 震,等.红 细 胞 预 处 理 对 小 鼠 脾 组 织 P 物 质 蛋 白 条 带 表 达 的 影 响[J].新乡医学院学报,2015,32(10):903.
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红 细 胞 预 处 理 对 小 鼠 脾 组 织 P 物 质 蛋 白 条 带 表 达 的 影 响
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《新乡医学院学报》[ISSN:1004-7239/CN:41-1186/R]

卷:
32
期数:
2015年10
页码:
903
栏目:
基础研究
出版日期:
2015-10-08

文章信息/Info

作者:
( 1. 新 乡 医 学 院 药 学 院 药 理 学 教 研 室 , 河 南 新 乡 453003; 2. 新 乡 医 学 院 药 学 院 药 物 分 析 教 研 室 , 河 南 新 乡
453003)

关键词:
文献标志码:
A
摘要:
目 的 针 对 蛋 白 质 印 迹 技 术 难 以 检 测 常 规 方 法 处 理 后 的 脾 组 织 中 的 P 物 质 ( SP) 蛋 白 , 探 讨 更 佳 的 脾 组
织 处 理 方 法 。 方 法 小 鼠 颈 椎 脱 臼 处 死 , 取 脑 组 织 测 质 量 后 进 行 粉 碎 , 离 心 弃 上 清 液 , 按 照 1 10( W V) 的 比 例 加 入
细 胞 组 织 快 速 放 射 免 疫 沉 淀 裂 解 液 和 蛋 白 酶 抑 制 剂 混 合 物 , 裂 解 30 min 后 进 行 提 取 。 脾 组 织 蛋 白 按 照 以 下 3 种 方 法
进 行 提 取 : ( 1) 采 取 与 脑 组 织 蛋 白 提 取 方 法 一 致 的 常 规 方 法 进 行 提 取 ; ( 2) 脾 组 织 预 先 采 用 胶 原 酶 Ⅰ进 行 消 化 , 用 红 细
胞 裂 解 液 裂 解 和 Hank′s 液 洗 涤 处 理 后 再 进 行 蛋 白 提 取 ; ( 3) 脾 组 织 不 进 行 Hank′s 液 洗 涤 , 其 他 步 骤 均 与 第 2 种 方 法
一 致 。 最 后 所 有 组 织 均 按 相 同 步 骤 进 行 蛋 白 质 印 迹 技 术 检 测 , 观 察 SP 蛋 白 表 达 水 平 。 结 果 用 常 规 方 法 提 取 后 , 脑
组 织 总 蛋 白 中 SP 蛋 白 条 带 表 达 明 显 , 脾 组 织 总 蛋 白 中 未 检 测 到 SP 蛋 白 条 带 。 脾 组 织 用 红 细 胞 裂 解 液 处 理 后 提 取 的
总 蛋 白 中 SP 蛋 白 表 达 条 带 较 为 明 显 , 但 有 非 特 异 性 条 带 。 脾 组 织 用 红 细 胞 裂 解 液 和 Hank′s 液 洗 涤 处 理 后 提 取 的 总
蛋 白 中 SP 蛋 白 条 带 表 达 明 显 , 无 非 特 异 性 条 带 。 结 论 用 红 细 胞 裂 解 液 和 Hank′s 液 预 处 理 小 鼠 脾 组 织 , 可 排 除 红 细
胞 的 干 扰 , 提 高 其 蛋 白 提 取 率 , 有 利 于 P 物 质 在 蛋 白 质 印 迹 技 术 中 的 条 带 表 达 。

更新日期/Last Update: 2015-10-08