[1]隋 娟,张高丽,李平法,等. 电穿孔转染法与脂质体转染法对K562和HepG2细胞转染效率的影响[J].新乡医学院学报,2015,(08):698-701.
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 电穿孔转染法与脂质体转染法对K562和HepG2细胞转染效率的影响
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《新乡医学院学报》[ISSN:1004-7239/CN:41-1186/R]

卷:
期数:
2015年08
页码:
698-701
栏目:
基础研究
出版日期:
2015-08-05

文章信息/Info

作者:
 隋 娟张高丽李平法于海川
 新乡医学院医学检验学院,河南 新乡 45300
关键词:
 电穿孔脂质体转染K562细胞HepG2细胞
文献标志码:
A
摘要:
目的 通过对电穿孔转染法和脂质体转染法在K562、HepG2细胞中的转染效率比较,探索最佳的细胞转方法和条件。方法 以K562、HepG2细胞为研究对象,采用电穿孔转染法和脂质体转染法分别转染带有绿色荧光的质粒PEGFPN1和无荧光的质粒pCDNA3.1、pCDNA3.1EOS基因,荧光显微镜下观察PEGFPN1转染效果,计算转染效率;收集各培养组细胞,裂解后提取蛋白,采用Westernblot方法检测基因转染后的蛋白表达。结果 当脉冲20ms、电阻90Ω、电压150V时进行电穿孔,转染质粒PEGFPN1,K562细胞可以得到较高的转染率;当脉冲20ms、电阻90Ω、电压250V时,转染质粒PEGFPN1,HpG2细胞可以得到较高的转染效率。在K562细胞和HepG2细胞中,电穿孔转染法的转染效率均显著高于脂质体转染法(P<0.05)。电穿孔转染法转染PEGFPN1后K562细胞和HepG2细胞的存活率显著低于脂质体法(P<0.05)。Westernblot结果显示电穿孔转染法蛋白表达量高于脂质体转染法(P<0.05)。结论 最佳条件下电穿孔转染法是一种高效的基因转染方法,对比较难转染的悬浮细胞效果更佳。

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更新日期/Last Update: 2015-08-07