目 的 通 过 RNA 干 扰 抑 制 鼻 咽 癌 58F 细 胞 内 源 性 原 癌 基 因 cmyc 的 过 表 达 , 观 察 cmyc 过 表 达 受 到 抑
制 后 对 58F 细 胞 生 物 学 特 性 的 影 响 。 方 法 构 建 针 对 cmyc 的 小 干 扰 RNA( siRNA) 真 核 表 达 载 体 , 利 用 Lipofectami
ne TM 2000 脂 质 体 转 染 58F 细 胞 , 建 立 稳 定 转 染 干 扰 组 细 胞 58F/ sicmyc; 同 法 建 立 阴 性 对 照 组 细 胞 58F/ sicontrol,
并 以 58F 为 空 白 对 照 组 细 胞 ; 通 过 半 定 量 反 转 录 聚 合 酶 链 反 应 和 Western blot 分 别 检 测 cmyc mRNA 和 蛋 白 水 平 表
达 , 鉴 别 干 扰 效 果 ; 通 过 四 甲 基 偶 氮 唑 蓝 比 色 法 检 测 干 扰 前 后 对 58F 细 胞 生 长 的 影 响 ; 通 过 流 式 细 胞 仪 分 析 干 扰 前 后
对 58F 细 胞 周 期 的 影 响 ; 通 过 透 射 电 镜 扫 描 观 察 干 扰 前 后 对 58F 细 胞 超 微 结 构 的 影 响 。 结 果 与 空 白 对 照 组 和 阴
性 对 照 组 细 胞 相 比 , 干 扰 细 胞 组 cmyc mRNA 和 蛋 白 表 达 水 平 均 显 著 下 调 ( P < 0. 05) , 细 胞 生 长 活 力 显 著 降 低 ( P <
0 05) , 细 胞 周 期 G 0 / G 1 期 细 胞 比 例 显 著 升 高 ( P <0. 05) , S 期 细 胞 比 例 显 著 降 低 ( P <0. 05) , 细 胞 超 微 结 构 发 生 明 显
改 变 。 结 论 干 扰 内 源 性 cmyc 的 siRNA 能 显 著 抑 制 58F 的 细 胞 生 长 和 细 胞 分 裂 增 殖 , cmyc 基 因 有 可 能 成 为 鼻 咽
癌 基 因 治 疗 新 靶 点 。