《新乡医学院学报》  2011年03期 276-78   出版日期:2011-05-20   ISSN:1004-7239   CN:41-1186/R
大肠埃希菌感染对U937细胞凋亡的影响及机制探讨


摘要:目的探讨大肠埃希菌(E.coli)感染对人巨噬细胞系U937细胞的促凋亡作用及其机制。方法调整
U937细胞与E.coli浓度比为120时,放入培养基中培养0、10、20、30、60和90 min,获得感染的U937细胞。采用流
式细胞仪检测不同感染时间U937细胞的细胞凋亡率,Western blot法检测U937细胞胞浆内第2线粒体激活剂
(Smac)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达水平。在E.coli感染前60 min用浓度0、10、20和40μmol·L-1的Em-
belin预处理U937细胞,然后在E.coli诱导U937细胞凋亡30 min后收集细胞,用Annexin V FITC/PI双染后用流式细
胞仪分析U937细胞的凋亡情况。结果当U937细胞E.coli浓度比为120时,感染0、10、20、30、60和90 min时
U937细胞凋亡率分别为(3.02±0.78)%、(6.67±1.34)%、(10.56±1.02)%、(33.92±2.66)%、(46.98±3.12)%
和(69.02±4.69)%,呈时间依赖性。U937细胞感染E.coli后发生凋亡,并且凋亡率随着E.coli感染时间的延长而升
高。Smac的表达随着E.coli感染时间的延长逐渐升高,XIAP的表达则随着感染时间的延长而逐渐降低,而且不同感
染时间组比较差别有统计学意义(P<0.05)。加入XIAP的抑制剂Embelin后,U937细胞的凋亡率随着Embelin的浓
度增加而逐渐升高(P<0.05)。结论人巨噬细胞系U937细胞感染E.coli后发生凋亡,其凋亡的发生与影响Smac
和XIAP的表达有关。Embelin通过特异性地抑制XIAP表达,增加E.coli诱导的U937细胞凋亡率。