《新乡医学院学报》  1993年01期 18-20   出版日期:1993-01-20   ISSN:1004-7239   CN:41-1186/R
小鼠腹水中抗人食管癌单克隆抗体的纯化


研究目的从小鼠腹水中纯化抗人食管癌单克隆抗体。处理方法小鼠腹水通过羟基磷灰石柱层析后(层析环境温度15℃,起始缓冲液pH6.8,0.01MPB。流速1ml/min,线性梯度洗脱液500ml,0.1~0.5MPB)。由酶联免疫过滤法(EIF)鉴别出抗体活性部分。然后以SDS-PAGE鉴定所得抗体的分子量及其纯度(10%聚丙烯酰胺凝胶,电极缓冲液pH8.3,上样量约50/μg,电流3.5mA/管,考马斯亮兰R-250染色)。研究结果层析洗脱液经紫外监测A280nm得出三个吸收峰;由EIF作抗体活性鉴定,确证第3个峰为活性部分;SDS-PAGE中于分子量约75KD及30KD处显示两个单一色带,相当于该单抗的重链和轻链。结论本法纯化所得抗人食管癌单克隆抗体纯度良好。