摘要: 目的观察氯通道阻断剂5-硝基-2-( 3-苯丙胺) 苯甲酸( NPPB) 在内皮素-1( ET-1) 对体外培养牛角膜内皮细
胞增殖中的作用。方法实验设7 组，对照组、1 g·L － 1二甲基亚砜( DMSO) 组、200 pmol·L － 1 ET-1 组、200 pmol·L － 1
ET-1 + 1 g·L － 1 DMSO 组和200 pmol·L － 1 ET-1 + 50 、100 、200 μmol·L － 1 NPPB 3 个实验组。采用倒置光学显微镜观
察牛角膜内皮细胞形态。采用四甲基偶氮唑盐( MTT) 比色分析法观察细胞增殖，计算细胞存活率。采用免疫细胞化
学检测细胞增殖细胞核抗原( PCNA) 表达，并采用计算机图像分析测定平均光吸收值。应用流式细胞仪检测细胞周期
时相的变化，计算细胞增殖指数。结果NPPB 能够使细胞形态发生异常，细胞内分裂相减少。50、100 μmol·L － 1
NPPB 使培养牛角膜内皮细胞MTT 光吸收值、细胞存活率和PCNA 阳性细胞的平均光吸收值较200 pmol·L － 1 ET-1 组
均显著降低，并具有浓度依赖性。而NPPB 浓度达到200 μmol·L － 1时，细胞趋于死亡。经100 μmol·L － 1的NPPB 处理
后，与对照组和200 pmol·L － 1 ET-1 组相比，出现明显的凋亡峰，G1 期细胞比例明显增高，S 期及G2 /M 期细胞比例则明
显降低，增殖指数明显下降。结论NPPB 浓度依赖性抑制ET-1 对培养BCECs 的增殖作用，使细胞周期停滞在G1 期。