《新乡医学院学报》  2009年06期 556-559   出版日期:2009-11-20   ISSN:1004-7239   CN:41-1186/R
ABI PRISM TM 3100型遗传分析仪最佳反应体系探讨


目的探讨ABI PRISMTM 3100型遗传分析仪的最佳反应体系,使DNA序列测定高效且经济。方法运用
含有重组质粒的饱和大肠杆菌E.coli菌液,采取碱裂解法提取质粒。依据测序原理,分别通过调整模板量、BigDye Mix
的用量和反应体系的体积来确定ABI PRISMTM 3100型遗传分析仪的最佳反应条件。结果针对该样本,测定DNA序
列的最佳反应体系为:模板量100 ng,BigDye Mix 2μL,引物1.6 pmol,双重蒸馏水补足总体积为10μL。结论该反应
体系保证了ABI PRISMTM 3100型遗传分析仪的测序质量,且大大节约了成本。