目的 建立real time逆转录聚合酶链反应(RT—PcR)检测AFP mRNA表达水平方法。方法 提取
BEL7402细胞总RNA，进行RT-PCR扩增并纯化AFP基因片段，构建重组质粒，建立real time RT—PCR检测
AFPmRNA表达水平方法。结果重组质粒的阳性克隆效率为81．8％，经酶切鉴定，目的基因片段已插入
PMD-18T载体内，得到real time RT-PCR动力学曲线。结论 成功建立了real time RT—PCR定量检测AFP
mRNA表达水平方法。