《新乡医学院学报》  2002年03期 153-157   出版日期:2002-05-20   ISSN:1004-7239   CN:41-1186/R
单纯疱疹病毒I型DNA疫苗的构建


目的构建表达单纯疱疹病毒1型糖蛋白D 的DNA 疫苗。方法 采用聚合酶
链式反应(PCR),从HSV一1基因组中扩增出gD基因,插人中间载体pGEM—T,然后克隆人真
核表达载体pcDNA3.1,构建重组质粒pLy-D.经部分测序和限制性内切酶分析证实。将pLy—
D转染Cos-7细胞,并肌肉接种ICR小鼠。用免疫组化和ELISA方法分别检测gD蛋白表达
及小鼠血清中的特异性抗体。结果转染的Cos一7细胞中有gD蛋白的表达;经三次肌肉免疫
接种的小鼠血清中有特异性HSV一1抗体产生。结论 本研究构建的重组质粒pLy—D能够在
哺乳动物细胞中表达目的蛋白,免疫接种后可以诱导动物产生免疫反应。