摘要: 　目的　通过将人催乳素(hPRL) 启动子上游的调控基因(包括启动子, - 3518 bp～ + 15 bp) 插入荧光素酶报告基因pGL3
- Basic 中,构建成含催乳素调控序列的荧光素酶报告基因( PRL3400 - pGL3 - Basic) ,用于催乳素在淋巴细胞中的表达调控研究。方法
　将含hPRL 启动子的PGEM - PRL3400 ,及荧光素酶报告基因pGL3 - Basic 转染大肠肝菌(JM109) 后扩增,提取并纯化PGEM -
PRL3400 和pGL3 - Basic ;分别以Sac Ⅰ、BamHI 酶切PGEM - PRL3400 ,Sac Ⅰ、Bgl Ⅱ酶切pGL3 - Basic ;电泳并回收PRL3400 片段和
pGL3 - Basic 酶切大片段,在T4 DNA 连接酶的作用下,将PRL3400 片段插入荧光素酶报告基因pGL3 - Basic 中。结果　通过酶切及基
因测序的方法证实所构建质粒含有pGL3 - Basic 全序列及催乳素启动子上游调控序列,并且PRL3400 片段调控序列的插入位置与方向
正确。结论　该荧光素酶报告基因构建成功。